MicroRNA-223通过靶向NLRP3调控VSV诱导的巨噬细胞Ⅰ型干扰素产生

【摘要】病毒感染机体后,干扰素(Interferon,IFNs)大量产生,Ⅰ型干扰素的产生在天然免疫中起重要的作用,对宿主的防御起关键作用。MicroRNAs(miRNAs)是近年发现的一类内源性的非编码RNA,它除了对基因表达的转录调控作用外,今年来发现miRNAs介导的转录后调节在调节基因的表达也有重要的作用。MicroRNA-223(miR-223)是特异性表达在髓系细胞的miRNA。对于miR-223在巨噬细胞中Ⅰ型干扰素产生的调控作用,以及靶点都还未有研究。我们发现,在小鼠巨噬细胞系RAW264.7或原代培养的巨噬细胞中,用VSV病毒感染,荧光定量PCR检测结果显示VSV病毒感染后巨噬细胞中miR-223的mRNA表达水平发生明显下调。用miR-223mimics进行功能性实验研究发现,miR-223过表达可明显促进VSV诱导的巨噬细胞IFN-α、IFN-βmRNA表达水平,而对TNF-α和IL-6的mRNA表达没有影响。在小鼠巨噬细胞系RAW264.7中转染miR-223mimics,用VSV-GFP病毒感染,运用共聚焦荧光显微镜和流式细胞术检测,发现过表达miR-223的细胞中荧光减少,说明miR-223在抗病毒感染中可能起重要的调节作用。由于miRNA发挥生物学功能主要通过调控其靶基因的表达,通过进一步的荧光素酶报告基因试验和荧光定量PCR等实验结果显示miR-223可以直接靶向抑制NLRP3的表达。同时,过表达NLRP3后,荧光素酶报告基因结果显示,IRF3和IFN-β的活性降低,说明NLRP3对Ⅰ型干扰素的产生可能有抑制作用。综上所述,我们的实验结果初步发现,VSV感染后巨噬细胞中miR-223表达下调,miR-223可通过靶向抑制NLRP3的表达,促进巨噬细胞IFN-α、IFN-β的分泌。上述研究为揭示非编码RNA在巨噬细胞天然免疫功能的精细调控中发挥的作用提供了理论依据,并可能为感染性疾病的诊治提供潜在的靶点和思路。
【作者】代凤；
【导师】王青青；
【作者基本信息】浙江大学，免疫学，2013，硕士
【关键词】巨噬细胞；microRNA-223；NLRP3；水疱性口炎病毒；

【参考文献】
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